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第一篇 临床实验室质量管理3

第一章　临床实验室管理概论3

第一节　临床实验室的定义、作用和功能3

第二节　临床实验室管理特性4

第三节　临床实验室管理过程6

第四节　临床实验室管理的政府行为8

第五节　临床实验室认可11

第六节　临床实验室质量管理概论13

第七节　临床实验室质量管理体系21

第八节　质量管理文件编写27

第二章　临床实验室质量管理要素39

第一节　分析前质量保证39

第二节　临床实验室检测系统、溯源及不确定度47

第三节　临床检验方法评价58

第四节　质量控制基础74

第五节　室内质量控制82

第六节　室间质量评价99

第七节　分析后质量保证113

第二篇 临床血液学检验121

第一章　临床血液一般检验121

第一节　血液标本采集与处理121

一、静脉采血法121

二、毛细血管采血法122

三、抗凝剂的选用122

四、血涂片制备123

五、血涂片染色123

第二节　血红蛋白测定124

一、氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法124

二、十二烷基硫酸钠血红蛋白（SLS-Hb）测定法125

第三节　红细胞计数126

第四节　红细胞形态学检查127

第五节　红细胞比容测定128

一、毛细管法128

二、温氏管法129

第六节　三种红细胞参数平均值的计算129

第七节　网织红细胞计数130

一、试管法131

二、Miller窥盘计数法（ICSH推荐）131

第八节　白细胞计数132

第九节　白细胞分类计数133

【附1】外周血正常几种类型白细胞形态学特点134

【附2】常见形态异常的白细胞135

第十节　嗜酸性粒细胞直接计数136

第十一节　血小板计数136

一、目视计数法136

二、血细胞分析仪计数法137

第十二节　血细胞自动分析仪137

第十三节　红细胞沉降率测定143

一、魏氏（Westergerm）测定法143

二、自动血沉仪测定法143

第二章　骨髓细胞检查145

第一节　骨髓细胞形态学检查145

一、骨髓象检查的步骤145

二、各系统骨髓细胞形态特征146

三、骨髓象检查的分析与报告152

四、骨髓象检查的临床意义154

第二节　细胞化学染色检查154

一、过氧化物酶（POX,MPO）染色154

（一）ICSH推荐法154

（二）氧化WG-KI法155

二、酯酶染色156

（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶（CAE）染色（ICSH推荐法）156

（二）α-乙酸萘酚酯酶（α-NAE）染色（偶氮偶联法）156

（三）酸性α-乙酸萘酚酯酶（ANAE）染色（ICSH推荐法）157

三、磷酸酶染色158

（一）中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色158

（二）酸性磷酸酶（ACP）染色（偶氮偶联法）158

四、糖类染色159

（一）过碘酸-Schiff反应（PAS）159

（二）阿利新蓝（alcian blue）染色（改良Lison法）160

（三）甲苯胺蓝（toluidine blue）染色161

五、脂类染色161

（一）苏丹黑B（SBB）染色（ICSH推荐法）161

（二）油红O（ORO）染色162

六、铁染色162

第三章　贫血的检查164

第一节　溶血性贫血的检查164

一、溶血性贫血的过筛试验164

（一）血浆游离血红蛋白测定（邻-甲联苯胺法）164

（二）血清结合珠蛋白测定165

（三）尿含铁血黄素检测（普鲁士蓝反应法）167

（四）高铁血红素白蛋白测定167

二、红细胞膜缺陷的检查168

（一）红细胞渗透脆性试验168

（二）红细胞孵育渗透脆性试验169

（三）红细胞自身溶血试验及其纠正试验170

（四）红细胞膜蛋白的十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）171

三、红细胞酶缺陷的检查173

（一）高铁血红蛋白还原试验173

（二）抗坏血酸-氰化物试验174

（三）Heinz小体（变性珠蛋白小体）检查174

（四）葡萄糖-6-磷酸脱氢酶荧光斑点试验175

（五）葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性测定175

（六）丙酮酸激酶（PK）荧光斑点试验178

（七）丙酮酸激酶活性测定179

四、血红蛋白异常的检查180

（一）血红蛋白（Hb）溶液的制备180

（二）微量醋酸纤维素膜血红蛋白电泳检测180

（三）异常血红蛋白定量测定182

（四）血红蛋白pH6.5电泳检测182

（五）HbA2醋酸纤维膜电泳定量测定182

（六）HbA2微量柱层析法定量测定183

（七）碱变性试验184

（八）血红蛋白F酸洗脱试验185

五、不稳定血红蛋白过筛试验185

（一）异丙醇试验185

（二）热不稳定试验186

（三）血红蛋白H包涵体检查186

六、血红蛋白异常的其他检查186

（一）红细胞镰变（HbS）试验186

（二）HbS溶解度试验187

（三）血红蛋白C试验187

（四）Hb肽链分析（尿素裂解法）188

（五）Hb吸收光谱测定188

（六）碳氧血红蛋白测定189

七、阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）的检查190

（一）蔗糖水溶血试验190

（二）酸溶血试验（Ham试验）191

（三）蛇毒因子溶血试验192

八、免疫性溶血性贫血检验192

（一）抗球蛋白试验（AGT）192

（二）冷凝集素试验193

（三）冷热溶血试验193

第二节　造血原料缺乏性贫血的检查194

一、缺铁性贫血的检验194

（一）红细胞内游离原卟啉（FEP）测定194

（二）血清铁测定194

（三）血清总铁结合力（TIBC）测定195

（四）血清铁蛋白测定195

（五）血清转铁蛋白测定195

（六）血清转铁蛋白受体测定196

二、叶酸和维生素B12缺乏的检测196

（一）血清和红细胞叶酸测定196

（二）血清维生素B12测定196

第四章　血栓与止血的检验197

第一节　血管壁和内皮细胞功能的检查197

一、出血时间测定（BT，模板式刀片法）197

二、内皮细胞功能的检查197

（一）血管性血友病因子抗原测定（vWF:Ag,ELISA法）197

（二）血管性血友病因子瑞斯托霉素辅因子测定（vWF:Rco，比浊法）198

（三）6-酮-前列腺素F1α测定（6-酮-PGF1α,ELISA法）199

（四）凝血酶调节蛋白活性测定（TM:A，发色底物显色法）199

（五）凝血酶调节蛋白抗原测定（TM:Ag，放射免疫法）200

第二节　血小板的功能与抗体检查201

一、血小板功能的检查201

（一）血小板黏附试验（PAdT，玻珠柱法和玻璃滤器法）201

（二）血小板聚集试验（PAgT，比浊法）202

（三）血浆β-血小板球蛋白（β-TG）和血小板第4因子（PF4）测定（ELISA法）203

（四）血浆P-选择素测定（ELISA法）203

（五）血小板第3因子有效性测定（PF3aT，复钙时间法）204

（六）血块收缩试验（CRT，血浆法，定量法）205

（七）血栓素B2测定（TXB2，放射免疫法）206

（八）11-脱氢-血栓素B2测定（11-DH-TXB2,ELISA法）207

二、血小板抗体检查207

（一）血小板相关抗体测定（PAIgG、PAIgA、PAIgM,ELISA法）207

（二）血小板寿命测定（TXB2，放射免疫法）208

（三）抗心磷脂抗体测定（ELISA法）209

第三节　凝血系统的检查209

一、凝血因子筛选试验209

（一）全血凝固时间测定（CT，凝固法）209

（二）活化凝血时间测定（ACT，凝固法）210

（三）活化部分凝血活酶时间测定（APTT，凝固法）210

（四）血浆凝血酶原时间测定（PT，一期法）211

（五）凝血因子Ⅷ定性试验（FⅧ，凝血块溶解法）212

二、凝血因子活性检查212

（一）凝血因子Ⅷ（FⅧ:C）、Ⅸ（FⅨ:C）、Ⅺ（FⅪ:C）、Ⅻ（FⅫ:C）的活性测定（一期法）212

（二）凝血因子Ⅱ（FⅡ:C）、Ⅴ（FⅤ:C）、Ⅶ（FⅦ:C）、Ⅹ（FⅩ:C）的活性测定（一期法）213

三、凝血因子Ⅷ／Ⅸ抗原测定（FⅧ:Ag/FⅨ:Ag，免疫火箭电泳法）214

四、血浆纤维蛋白原含量测定（Fg）215

（一）Clauss法（凝血酶法）215

（二）酶联免疫分析法215

五、可溶性纤维蛋白单体复合物测定（sFMC,ELISA法）216

第四节　抗凝系统的检查216

一、抗凝血酶测定216

（一）抗凝血酶抗原含量测定（AT:Ag,ELISA法）216

（二）抗凝血酶活性测定（AT:A，发色底物显色法）217

二、蛋白C系统测定218

（一）蛋白C抗原测定（PC:Ag，免疫火箭电泳法）218

（二）蛋白C活性测定（PC:A，发色底物显色法）218

三、蛋白S抗原测定（PS:Ag，免疫火箭电泳法）219

四、凝血酶-抗凝血酶复合物测定（TAT,ELISA法）219

第五节　病理性抗凝物质检查221

一、抗凝物质筛选试验221

（一）复钙交叉试验221

（二）凝血酶时间延长的甲苯胺蓝纠正试验（游离肝素时间测定）221

二、血浆肝素浓度测定（发色底物显色法）221

三、凝血因子Ⅷ抑制物测定（Bethesda法）222

四、Lupo试验和Lucor试验224

第六节　纤溶系统的检查224

一、优球蛋白溶解时间测定（ELT，加钙法）224

二、纤溶活性的检查225

（一）组织型纤溶酶原激活剂活性测定（t-PA:A，发色底物显色法）225

（二）组织型纤溶酶原激活剂抗原测定（t-PA:Ag,ELISA法）226

（三）纤溶酶原活性测定（PLG:A，发色底物显色法）227

（四）纤溶酶原抗原测定（PLG:Ag,ELISA法）227

（五）纤溶酶原激活抑制剂-1活性测定（PAI-1:A，发色底物显色法）228

（六）纤溶酶原激活抑制剂-1抗原测定（PAI-1:Ag,ELISA法）228

（七）α2-抗纤溶酶活性测定（α2-AP:A，发色底物显色法）229

（八）α2-抗纤溶酶抗原测定（α2-AP:Ag,ELISA法）230

（九）纤溶酶-抗纤溶酶复合物测定（PAP,ELISA法）231

三、纤维蛋白（原）降解产物的检查232

（一）血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（3P试验，凝固法）232

（二）凝血酶时间测定（TT，凝固法）232

（三）血清纤维蛋白（原）降解产物定性试验（FDP，胶乳凝集法）233

（四）尿纤维蛋白（原）降解产物测定（FDP,ELISA法）233

（五）D-二聚体定性试验（D-D，胶乳凝集法）234

（六）D-二聚体定量测定（D-D,ELISA法）234

第七节　血液流变学检查235

一、全血黏度测定235

（一）毛细管黏度计法测定236

（二）旋转式黏度计法测定236

二、血浆黏度测定（毛细管黏度计法）236

三、红细胞聚集性测定（红细胞沉降法）237

四、红细胞变形性测定237

（一）黏性检测法237

（二）微孔滤过法238

五、红细胞表面电荷测定（红细胞电泳法）239

六、与血液流变学有关的其他检查239

七、血液流变学检查的影响因素239

八、血液流变学检查的临床意义240

第五章　血液寄生虫检查242

第一节　疟原虫检查242

第二节　微丝蚴检查243

第三节　回归热螺旋体检查244

第四节　黑热病利-朵氏体检查244

第五节　弓形虫检查245

第六章　血型血清学检查246

第一节　ABO血型鉴定246

一、ABO血型鉴定246

二、A1和A2亚型鉴定248

三、其他A亚型鉴定249

四、B亚型鉴定249

第二节　Rh血型鉴定249

一、Rh血型鉴定249

二、弱D（weak D）型鉴定251

第三节　其他血型鉴定252

一、MN血型鉴定252

二、P血型鉴定252

第四节　血型血清学常用检查方法253

一、抗人球蛋白试验253

二、唾液中HAB血型物质测定254

三、吸收试验255

四、放散试验256

五、IgG抗A（B）测定257

六、凝聚胺（Polybrene）试验258

第五节　红细胞血型抗体筛查258

一、筛查方法258

二、抗体筛查试验结果的判读261

三、抗体筛查试验结果的解释261

第六节　红细胞血型抗体鉴定262

第七节　交叉配血试验262

一、交叉配血方法262

二、交叉配血试验中的不配合问题264

第八节　微柱凝胶试验264

第九节　新生儿溶血病的血型血清学检查266

一、ABO HDN血型血清学检查266

二、Rh HDN血型血清学检查268

三、患儿换血的准备270

第三篇 临床体液检验275

第一章　尿液检验275

第一节　尿液标本的收集和处理275

一、尿液收集275

二、尿液防腐与保存276

三、检验后尿液标本的处理276

第二节　尿液一般性状检查276

一、尿量276

二、尿液颜色276

三、尿液透明度277

四、尿液酸碱度277

五、尿液比密277

第三节　尿液渗量测定278

第四节　尿液化学检查279

一、尿蛋白质定性试验279

二、尿蛋白质定量测定281

三、尿本-周氏蛋白定性试验281

四、尿肌红蛋白定性试验282

五、尿血红蛋白定性试验283

六、尿含铁血黄素定性试验283

七、尿葡萄糖定性试验284

八、尿葡萄糖定量测定285

九、尿酮体定性试验285

十、尿乳糜定性试验286

十一、尿胆红素定性试验287

十二、尿胆原定性试验287

十三、尿紫胆原定性试验288

十四、尿苯丙酮酸定性试验289

十五、尿亚硝酸盐定性试验289

十六、尿白细胞酯酶定性试验290

十七、尿维生素C定性试验290

十八、尿液化学检验的质量控制290

十九、使用尿液干化学分析仪应注意的问题291

二十、使用尿液干化学试带应注意的问题291

第五节　尿沉渣检查293

一、规范化尿沉渣检查293

二、自动化尿有形成分检查296

三、1小时尿沉渣计数296

四、尿有形成分形态学特点297

【附】尿中颗粒计数参考方法299

第六节　妊娠试验300

一、金标抗体检测法300

二、双抗体夹心酶联免疫吸附法（双位点免疫酶分析法）300

第七节　远端肾单位功能试验301

莫氏（Mosenthal）浓缩稀释试验301

第二章　粪便检查302

第一节　粪便标本收集方法及注意事项302

第二节　检验后粪便标本的处理302

第三节　一般性状检查302

一、颜色302

二、性状303

三、寄生虫虫体303

第四节　粪便显微镜检查303

一、直接涂片镜检303

二、直接涂片镜检细胞的临床意义303

三、虫卵及原虫直接检查法304

四、虫卵及包囊浓聚法305

五、寄生虫幼虫孵育法307

六、隐孢子虫卵囊染色检查法308

七、肛门周围寄生虫检查法308

八、粪便寄生虫形态学特点309

第五节　粪便隐血试验310

一、免疫学检测法310

二、试带法311

三、邻联甲苯胺法311

第三章　体液及排泄物检查312

第一节　脑脊液检查312

一、标本处理312

二、一般性状检查312

三、蛋白定性试验312

四、有形成分检查313

五、细菌直接涂片检查314

六、真菌检查——新型隐球菌检查314

七、脑脊液分光分析法检查314

第二节　浆膜腔积液检查315

一、标本收集315

二、一般性状检查315

三、浆膜黏蛋白定性试验315

四、总蛋白定量及白蛋白定量测定315

五、乳酸脱氢酶测定316

六、腺苷脱氨酶测定316

七、铁蛋白测定316

八、癌胚抗原测定316

九、溶菌酶测定316

十、显微镜检查316

十一、染色体检查316

十二、漏出液与渗出液的鉴别317

十三、非癌性与癌性积液的鉴别317

第三节　滑膜液检查318

一、标本收集318

二、检查内容318

三、临床意义319

第四节　精液检查319

一、标本收集319

二、一般性状检查319

三、精子存活率320

四、精子活力321

五、精子计数321

六、精子形态观察321

七、精子凝集322

八、非精子细胞322

九、其他成分322

十、参考区间323

十一、临床意义323

第五节　前列腺液检查323

第六节　阴道分泌物检查324

一、清洁度324

二、滴虫检查324

三、霉菌检查324

四、线索细胞及胺试验324

第七节　阴道脱落细胞检查324

一、标本收集处理324

二、常规染色方法325

三、宫颈癌及癌前病变的细胞学过筛检查327

第八节　胃液检查329

第九节　十二指肠引流液及胆汁检查330

第十节　痰液检查331

第四篇 临床化学检验337

第一章　蛋白质测定337

第一节　血清总蛋白测定337

一、双缩脲常规法337

二、双缩脲比吸光度法338

第二节　血清白蛋白测定339

一、溴甲酚绿法339

二、溴甲酚紫法340

第三节　血清黏蛋白测定341

第四节　脑脊液总蛋白测定342

一、邻苯三酚红钼络合显色法342

二、比浊法343

三、染料结合法343

第五节　血清蛋白醋酸纤维素膜电泳344

第六节　糖化血红蛋白测定347

一、离子交换层析法348

二、HbA1c免疫法349

三、亲和层析法350

第七节　糖化血清蛋白测定351

第八节　血清肌红蛋白测定352

第九节　血清肌钙蛋白Ⅰ测定353

第十节　血清前白蛋白测定354

第十一节　尿微量白蛋白测定355

一、透射比浊法356

二、染料结合法357

第二章　糖类测定359

第一节　血清葡萄糖测定359

一、己糖激酶法359

二、葡萄糖氧化酶法360

三、葡萄糖脱氢酶法361

第二节　口服葡萄糖耐量试验363

第三节　脑脊液葡萄糖测定364

第四节　尿液葡萄糖测定364

第五节　血液乳酸测定364

一、血浆乳酸测定365

二、全血乳酸测定366

第六节　血液丙酮酸测定367

一、血浆丙酮酸测定367

二、全血丙酮酸测定368

第七节　血清β-羟丁酸测定369

第三章　血清无机离子测定371

第一节　血清钾钠测定371

一、离子选择电极法371

二、火焰光度法372

三、钾的酶法测定374

四、钠的酶法测定375

第二节　血清氯化物测定376

一、离子选择电极法376

二、电量分析法377

三、硫氰酸汞比色法377

四、硝酸汞滴定法378

第三节　血浆（清）碳酸氢根及总二氧化碳测定379

一、酶法379

二、电极法380

三、滴定法381

第四节　血浆阴离子隙的计算382

第五节　血清总钙测定383

一、甲基麝香草酚蓝比色法383

二、邻-甲酚酞络合酮比色法383

三、乙二胺四乙酸二钠滴定法384

第六节　血清离子钙测定385

第七节　血清无机磷测定387

一、紫外分光光度法387

二、硫酸亚铁磷钼蓝比色法388

三、米吐尔直接显色法388

第八节　血清镁测定389

一、甲基麝香草酚蓝比色法389

二、Calmagite染料比色法390

三、原子吸收分光光度法391

第九节　血清铁和总铁结合力测定392

第十节　血清铜测定393

一、原子吸收分光光度法393

二、比色法394

第十一节　血清锌测定395

一、原子吸收分光光度法395

二、单扫描示波极谱法396

三、吡啶偶氮酚显色法396

第十二节　全血铅测定397

一、石墨炉原子吸收光谱法397

二、微分电位溶出法398

三、钨舟无焰原子吸收光谱法400

【附一】血铅临床检验技术规范402

【附二】全血铅检测可选用的分析方法404

第四章　血清酶活性测定406

第一节　血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性测定406

一、速率法406

二、赖氏比色法408

第二节　血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性测定410

一、速率法410

二、赖氏法412

第三节　血清碱性磷酸酶（ALP）活性测定412

一、速率法412

二、比色法414

第四节　血清酸性磷酸酶（ACP）活性测定415

第五节　血清乳酸脱氢酶（LDH）活性测定416

一、乳酸为底物的速率法（LD-L法）416

二、丙酮酸为底物的速率法（LD-P法）417

第六节　血清L-γ-谷氨酰基转移酶（GGT）活性测定418

一、L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺为底物的速率法418

二、重氮反应比色法419

第七节　血清肌酸激酶（CK）活性测定421

第八节　血清淀粉酶（AMS）活性测定423

一、亚乙基-4-NP-麦芽庚糖苷法（EPS法）424

二、碘-淀粉比色法425

第九节　血清胆碱酯酶（ChE）活性测定426

一、速率法426

二、比色法427

第十节　血清腺苷脱氨酶（ADA）活性测定429

一、速率法429

二、比色法429

第十一节　血清脂肪酶（LPS）活性测定431

一、偶联法431

二、色原底物法432

三、比浊法433

第十二节　血清单胺氧化酶（MAO）活性测定434

一、速率法434

二、醛苯腙法435

第十三节　血清5′-核苷酸酶（5′-NT）活性测定436

一、速率法436

二、钼蓝显色法437

第十四节　血清α-羟丁酸脱氢酶（α-HBD）活性测定438

第十五节　血清β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）活性测定439

一、CNP-NAG速率法439

二、荧光光度法440

三、对硝基酚比色法441

第十六节　血清α-L-岩藻糖苷酶活性测定443

一、速率法443

二、终点法443

第十七节　血清肌酸激酶同工酶测定444

一、单克隆抗体免疫法测定CK-MB445

二、琼脂糖电泳法445

三、免疫抑制法测定CK-MB或CK-B（包括非M-CK）446

四、琼脂糖电泳法测定CK-MM亚型446

第十八节　血清乳酸脱氢酶同工酶测定447

一、琼脂糖电泳法448

二、乙酸纤维素膜电泳法448

第十九节　血清碱性磷酸酶同工酶测定449

一、乙酸纤维素膜电泳法449

二、热稳定性试验450

三、对抑制剂的敏感试验451

第五章　肝功能检验452

第一节　血清胆红素测定452

一、改良J-G法452

二、胆红素氧化酶法454

三、钒酸盐氧化法456

第二节　胆汁酸测定458

一、酶循环法458

二、酶比色法458

第三节　血浆氨测定460

第六章　血清非蛋白含氮类化合物测定463

第一节　血清尿素测定463

一、酶偶联速率法463

二、脲酶-波氏比色法464

三、二乙酰一肟显色法464

第二节　血清肌酐测定465

一、肌氨酸氧化酶法466

二、苦味酸速率法466

三、去蛋白终点法467

四、内生肌酐清除率测定468

第三节　血清胱抑素C测定470

第四节　血清尿酸测定471

一、尿酸酶-过氧化物酶偶联法471

二、磷钨酸还原法472

第七章　血脂、脂蛋白、载脂蛋白测定474

第一节　标本采集与处理474

第二节　血清总胆固醇测定474

一、酶法（COD-PAP法）474

二、正己烷抽提L-B反应显色法（CDC参考方法）477

第三节　血清三酰甘油测定479

一、酶法（GPO-PAP法）479

二、去游离甘油的TG测定（二步酶法）480

三、变色酸显色法（CDC参考方法）483

第四节　高密度脂蛋白胆固醇测定484

一、匀相测定法485

二、超速离心结合选择性沉淀法（CDC参考方法）487

三、硫酸葡聚糖-Mg沉淀法（CDC指定的比较方法）487

四、磷钨酸-镁沉淀法487

第五节　低密度脂蛋白胆固醇测定488

一、匀相测定法488

二、β-定量法（CDC参考方法）490

三、PVS沉淀法490

四、Friedewald公式计算法491

第六节　血清载脂蛋白测定491

一、免疫透射比浊法测定apoA1和apoB491

二、免疫透射比浊法测定脂蛋白（a）494

第八章　血气与酸碱分析496

第一节　血液标本的采集和保存496

第二节　电极的保养及注意事项497

第三节　血气及酸碱分析常用参数含义及参考值498

第四节　血气分析及酸碱失衡的判断502

第五节　血气分析前必须注意的几个问题510

第九章　激素测定511

第一节　垂体激素测定511

一、促黄体素测定511

二、卵泡刺激素测定513

三、泌乳素测定515

四、促甲状腺激素测定517

第二节　人绒毛膜促性腺激素测定519

一、TrFIA法519

二、CLIA法520

三、ECLIA法520

第三节　甲状腺激素测定521

一、三碘甲状腺原氨酸测定521

二、甲状腺素测定523

三、游离三碘甲状腺原氨酸测定524

四、游离甲状腺素测定526

第四节　性激素测定528

一、睾酮测定528

二、雌二醇测定530

三、雌三醇测定532

四、孕酮测定533

第五节　胰激素测定535

一、胰岛素测定535

二、C肽测定536

第六节　甲状旁腺素测定537

第七节　肾上腺激素测定537

一、皮质醇测定537

二、尿液中17-酮类固醇测定538

三、尿液中17-羟皮质类固醇测定540

四、尿液中香草扁桃酸测定542

第十章　自动生化分析仪546

第一节 自动生化分析仪的校准546

第二节 自动生化分析仪的检定547

第三节 自动生化分析仪分析参数的设置549

第四节 自动生化分析仪用的试剂盒552

第五节 自动生化分析仪的管理553

第五篇 临床免疫学检验559

第一章　免疫学检验的常用技术559

第一节　免疫比浊技术559

第二节　生物素与链霉亲合素的应用技术560

一、生物素560

二、链霉亲合素（SA）562

三、生物素-链霉亲合素系统的应用562

第三节　金标记免疫分析技术562

第四节　免疫电泳技术564

第五节　抗体提取纯化技术566

一、硫酸铵盐析法566

二、辛酸法566

三、DEAE-纤维素一次提取法567

第六节　放射免疫分析技术568

一、放射免疫分析法568

二、免疫放射分析法569

第七节　免疫荧光测定技术570

一、免疫荧光（荧光抗体）技术570

二、时间分辨荧光免疫分析571

第八节　酶联免疫吸附试验572

第九节　化学发光免疫分析技术574

一、化学发光免疫分析法574

二、电化学发光免疫分析575

第十节　免疫印迹技术576

第十一节　流式细胞术577

第十二节　免疫学检验的质量控制578

第二章　天然免疫功能测定581

第一节　嗜中性粒细胞免疫功能测定581

一、嗜中性粒细胞趋化功能测定581

（一）琼脂糖胶板法测定NPG趋化功能581

（二）滤膜法测定NPG趋化功能582

二、嗜中性粒细胞黏附功能测定583

三、嗜中性粒细胞吞噬与杀菌功能测定583

（一）白色念珠菌法测定NPG吞噬与杀菌功能583

（二）葡萄球菌法测定NPG吞噬功能584

（三）溶菌法测定NPG杀菌功能584

（四）硝基四氮唑蓝还原试验测定NPG吞噬杀菌功能585

第二节　NK细胞功能测定586

第三节　单核-吞噬细胞功能测定587

第四节　溶菌酶测定588

一、琼脂平板溶菌环法测定溶菌酶588

二、ELISA法测定溶菌酶588

第五节　甘露糖结合凝集素测定589

第六节　急性期蛋白测定590

一、C反应蛋白测定590

（一）免疫比浊法测定CRP591

（二）ELISA法测定CRP591

二、m清淀粉样蛋白A测定592

三、脂多糖结合蛋白测定592

第七节　选择素测定593

第三章　免疫球蛋白、循环免疫复合物与补体测定595

第一节　IgG、IgA、IgM测定595

一、单向环状免疫扩散法（SRID）测定IgG、IgA、IgM595

二、免疫比浊法测定IgG、IgA、IgM596

第二节　IgD测定597

第三节　IgE测定597

第四节　游离轻链测定598

第五节　冷球蛋白测定599

第六节　M蛋白测定600

第七节　循环免疫复合物测定601

一、聚乙二醇沉淀比浊法测定循环免疫复合物601

二、ELISA法测定循环免疫复合物602

第八节　补体测定603

一、补体经典途径溶血活性（CH50）测定604

二、补体旁路途径溶血活性（AP50）测定605

三、补体C3、C4含量测定605

第四章　细胞免疫相关指标测定607

第一节　淋巴细胞亚群测定607

一、流式细胞术测定淋巴细胞亚群607

二、免疫荧光法测定淋巴细胞亚群608

三、AP-AAP桥联酶免疫法测定淋巴细胞亚群608

第二节　淋巴细胞增殖试验609

第三节　淋巴细胞功能测定610

第四节　白细胞介素-2（IL-2）测定611

第五节　白细胞介素-4（IL-4）测定612

第六节　白细胞介素-6（IL-6）测定613

第七节　白细胞介素-8（IL-8）测定613

第八节　γ干扰素（IFN-γ）测定614

第九节　肿瘤坏死因子-α（TNF-α）测定615

第十节　可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2R）测定616

第五章　传染病的免疫学检查617

第一节　甲型病毒性肝炎血清学检测617

第二节　乙型病毒性肝炎血清学检测618

一、HBsAg测定618

（一）ELISA法测定HBsAg618

（二）金标记免疫渗滤和金标记免疫层析法测定HBsAg619

二、抗HBs测定620

三、HBeAg及抗HBe测定620

四、抗HBc测定620

（一）ELISA法测定总抗HBc620

（二）ELISA法测定抗HBc-IgM621

第三节　丙型病毒性肝炎血清学检测621

一、ELISA法测定抗HCV-IgG抗体622

二、重组免疫印迹实验（RIBA）测定抗HCV-IgG抗体623

三、ELISA法测定HCV抗原623

第四节　戊型病毒性肝炎的血清学检测624

第五节　抗人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测625

一、ELISA法测定抗HIV抗体626

二、乳胶颗粒凝集试验测定抗HIV抗体626

三、免疫印迹法（WB）测定抗HIV抗体627

第六节　ToRCH感染的血清学检测628

一、抗弓形虫抗体测定628

二、抗风疹病毒抗体测定629

三、巨细胞病毒抗原与抗体测定630

（一）免疫荧光法测定CMV pp65抗原630

（二）ELISA法测定抗HCMV-IgM类抗体630

四、抗单纯疱疹病毒抗体测定631

第七节　沙眼衣原体感染的血清学检测632

一、ELISA法测定抗沙眼衣原体抗体632

二、间接免疫荧光法测定抗沙眼衣原体抗体633

第八节　严重急性呼吸综合征的血清学检测634

一、双抗原夹心ELISA法测定抗SARS病毒抗体634

二、间接ELISA法测定抗SARS病毒抗体635

三、间接免疫荧光法测定抗SARS病毒抗体635

第九节　轮状病毒感染的检测636

一、金标记免疫层析试验测定轮状病毒抗原636

二、ELISA法测定轮状病毒抗原637

三、反向间接血凝法测定轮状病毒抗原637

第十节　腺病毒感染的血清学检测638

第十一节　肺炎衣原体感染的血清学检测638

一、间接ELISA法测定抗肺炎衣原体抗体639

二、间接免疫荧光法测定抗肺炎衣原体抗体639

第十二节　肺炎支原体感染的血清学检测640

第十三节　伤寒和副伤寒的血清学检测641

第十四节　布鲁菌病的血清学检测642

一、玻片凝集试验测定抗布鲁菌抗体642

二、试管凝集试验测定抗布鲁菌抗体642

三、胶乳凝集试验测定抗布鲁菌抗体642

第十五节　军团菌病的血清学检测643

一、微量凝集试验测定抗嗜肺军团菌抗体643

二、间接免疫荧光法测定抗嗜肺军团菌抗体643

三、ELISA法测定抗嗜肺军团菌抗体643

第十六节　幽门螺杆菌感染的血清学检测644

一、ELISA法测定抗幽门螺杆菌抗体644

二、间接免疫荧光法测定抗幽门螺杆菌抗体645

三、免疫印迹法（WB）测定抗幽门螺杆菌抗体645

第十七节　结核分枝杆菌病的血清学检测646

第十八节　梅毒的血清学检测647

一、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）647

二、ELISA法测定抗梅毒螺旋体（TP）抗体648

三、密螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）测定抗梅毒螺旋体抗体648

四、金标记免疫层析试验测定抗梅毒螺旋体抗体649

【附】梅毒螺旋体暗视野显微镜检查650

第六章 自身抗体测定651

第一节　类风湿因子（RF）测定651

一、胶乳凝集试验测定（RF）651

二、免疫比浊法测定RF651

三、双抗原夹心ELISA法测定RF652

四、ELISA法测定IgG、IgA、IgM类RF652

第二节　抗环瓜氨酸肽抗体测定653

第三节　抗核周因子与抗角蛋白抗体测定654

第四节　抗核抗体测定655

一、间接免疫荧光（IIF）法测定ANA655

二、ELISA法测定ANA657

第五节 抗双链DNA（dsDNA）抗体测定658

一、间接免疫荧光法（IIF）测定抗dsDNA抗体658

二、放射免疫分析法（Farr试验）测定抗dsDNA抗体659

三、ELISA法测定抗dsDNA抗体659

四、金标记免疫渗滤法测定抗dsDNA抗体660

第六节　抗ENA抗体测定660

一、免疫印迹法测定抗ENA抗体660

二、免疫斑点法测定抗ENA抗体661

第七节　抗组蛋白抗体测定663

第八节　抗核小体抗体测定664

第九节　抗核糖体抗体（抗rRNP）测定664

第十节　抗线粒体抗体测定665

一、间接免疫荧光法测定抗线粒体抗体665

二、ELISA法测定抗线粒体抗体666

三、免疫斑点法测定抗线粒体抗体666

第十一节　抗肝抗原自身抗体测定667

一、抗肝特异性脂蛋白（LSP）抗体测定667

（一）ELISA法测定抗LSP抗体667

（二）间接免疫荧光法测定抗LSP抗体668

二、抗肝细胞膜抗原（LMA）抗体测定668

三、抗线粒体抗体（AMA）测定668

四、抗肝肾微粒体（LKM）抗体测定668

（一）间接免疫荧光法测定抗LKM抗体669

（二）ELISA法测定抗LKM抗体669

五、抗平滑肌抗体（SMA）测定670

六、抗可溶性肝抗原／肝胰抗原（SLA/LP）抗体测定670

（一）ELISA法测定抗SLA/LP抗体671

（二）免疫斑点法测定抗SLA/LP抗体671

七、抗Sp-100抗体（抗核颗粒抗体）测定671

（一）间接免疫荧光法测定抗Sp-100抗体672

（二）ELISA法测定抗Sp-100抗体672

八、抗去唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）抗体测定672

九、抗肝细胞溶质抗原1型（LC-1）抗体测定673

第十二节　抗嗜中性粒细胞胞浆抗体（cANCA/pANCA）测定674

一、间接免疫荧光法测定ANCA674

二、ELISA法测定特异性ANCA675

第十三节　抗甲状腺球蛋白、抗甲状腺微粒体或抗甲状腺过氧化物酶抗体测定675

一、间接免疫荧光法测定A-TG、A-TM675

二、ELISA法测定A-TG、A-TPo676

三、放射免疫分析法（RIA）测定A-TG、A-TPO676

四、电化学发光免疫分析法测定A-TG、A-TPO677

第十四节　抗心磷脂抗体（ACA）与抗β2-GP1抗体测定678

第十五节　抗精子抗体（AsAb）测定679

一、试管-玻片凝集试验测定抗精子抗体679

二、精子制动试验测定抗精子抗体680

三、ELISA法测定抗精子抗体680

四、间接免疫荧光法测定抗精子抗体680

五、免疫珠试验测定抗精子抗体680

第十六节　抗子宫内膜抗体（EmAb）测定682

第十七节　抗透明带（AZP）抗体测定683

一、ELISA法测定抗透明带抗体683

二、间接免疫荧光法测定抗透明带抗体683

第十八节　抗卵巢抗体（AoAb）测定684

第十九节　抗乙酰胆碱受体抗体（AchR-Ab）测定685

第二十节　抗胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体测定685

一、间接免疫荧光法测定抗胰岛细胞抗体686

二、放射免疫分析法测定胰岛素自身抗体686

第二十一节　抗肾小球基底膜抗体（GBM-Ab）测定687

第七章　肿瘤标志物测定689

第一节　甲胎蛋白（AFP）测定689

一、ELISA法测定AFP689

二、CLIA法测定AFP690

第二节　癌胚抗原（CEA）测定691

一、ELISA法测定CEA691

二、CLIA法测定CEA692

第三节　CA19-9测定692

一、IRMA法测定CA19-9692

二、ELISA法测定CA19-9693

三、ECLIA法测定CA19-9694

第四节　CA125测定694

一、ELISA法测定CA125694

二、ECLIA法测定CA125695

第五节　CA15-3测定696

一、ELISA法测定CA15-3696

二、ECLIA法测定CA15-3696

第六节　CA242测定697

一、IRMA法测定CA242697

二、ELISA法测定CA242698

第七节　CA72-4测定699

一、ELISA法测定CA72-4699

二、IRMA法测定CA72-4699

三、ECLIA法测定CA72-4699

第八节　神经元特异烯醇化酶（NSE）测定700

一、ELISA法测定NSE701

二、ECLIA法测定NSE701

第九节　细胞角蛋白19片段（cyfra21-1）测定702

一、ELISA法测定cyfra21-1702

二、IRMA法测定cyfra21-1703

第十节　前列腺特异抗原（PSA）测定703

一、总PSA（t-PSA）测定704

（一）ELISA法测定总PSA（t-PSA）704

（二）CLIA法测定总PSA（t-PSA）704

（三）ECLIA法测定t-PSA705

二、结合PSA（c-PSA）测定705

（一）CLIA法测定结合PSA（c-PSA）705

（二）ECLIA法测定结合PSA（c-PSA）706

三、游离PSA（f-PSA）测定706

（一）ELISA法测定游离PSA（f-PSA）706

（二）CLIA法测定游离PSA（f-PSA）707

（三）ECLIA法测定游离PSA（f-PSA）707

第十一节　人绒毛膜促性腺激素（HCG）测定708

一、CLIA法测定HCG708

二、ELISA法检测HCG708

第十二节　抗人乳头瘤病毒抗体测定709

第十三节　抗Epstein-Barr病毒抗体测定710

第十四节　β2微球蛋白测定712

第六篇　临床微生物学检验715

第一章　临床微生物实验室管理概论715

第一节　临床微生物实验室的基本条件715

第二节　临床微生物实验室生物安全管理718

第三节　临床微生物实验室信息管理719

第四节　临床微生物检验的质量保证720

第五节　临床微生物实验室菌株保存和管理724

第六节　基本染色方法725

第七节　临床细菌实验常用培养基728

第八节　临床细菌实验基本的生化鉴定培养基及诊断血清731

第九节　消毒与灭菌733

第二章　临床细菌检验标本的采集、运送、保存和处理736

第一节　临床细菌检验标本的采集、运送和保存736

第二节　临床细菌检验标本的处理737

第三节　血液和骨髓标本的处理738

第四节　脑脊液标本的处理741

第五节　尿标本的采集、运送和处理743

第六节　下呼吸道标本的处理744

第七节　粪便标本的处理746

第八节　眼、耳、鼻、喉标本的收集和处理749

第九节　脓液标本的处理（病灶分泌物）750

第十节　无菌体液标本的处理751

第十一节　生殖系统标本的处理753

第三章　临床微生物的常规鉴定754

第一节　葡萄球菌属常规鉴定755

第二节　链球菌属常规鉴定763

第三节　肠球菌属常规鉴定770

第四节　气球菌属及其相关菌属常规鉴定775

第五节　奈瑟菌属、卡他莫拉菌常规鉴定778

第六节　李斯特菌属和丹毒丝菌属常规鉴定783

第七节　棒状杆菌属及相关菌属鉴定785

第八节　诺卡菌属、红球菌属常规鉴定789

第九节　分枝杆菌属常规鉴定791

第十节　需氧芽胞杆菌属常规鉴定798

第十一节　肠杆菌科的常规鉴定801

第十二节　弧菌属常规鉴定822

第十三节　气单胞菌属常规鉴定825

第十四节　不动杆菌属、莫拉菌属、金黄杆菌属常规鉴定827

第十五节　假单胞菌属常规鉴定831

第十六节　伯克霍尔德菌属、寡养单胞菌属、丛毛菌属、食酸菌属及相关菌属常规鉴定834

第十七节　嗜血杆菌属常规鉴定836

第十八节　放线杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属、心杆菌属和色杆菌属常规鉴定839

第十九节　产碱杆菌属、无色杆菌属、苍白杆菌属和根瘤菌属常规鉴定842

第二十节　巴斯德菌属常规鉴定844

第二十一节　鲍特菌属常规鉴定845

第二十二节　弗朗西丝菌属常规鉴定846

第二十三节　布鲁菌属常规鉴定847

第二十四节　军团菌属常规鉴定848

第二十五节　弯曲杆菌属、弓形菌属和螺杆菌属常规鉴定852

第二十六节　消化球菌属和消化链球菌属常规鉴定857

第二十七节　韦荣球菌属常规鉴定859

第二十八节　拟杆菌属和梭杆菌属及相关菌属常规鉴定859

第二十九节　丙酸杆菌属、放线菌属、真杆菌属、乳杆菌属和双歧杆菌属常规鉴定863

第三十节 梭状芽胞杆菌属常规鉴定865

第三十一节　细菌的L型869

第四章　临床真菌检验程序871

第一节　毛癣菌属、小孢子菌属、表皮癣菌属、糠秕马拉色霉菌常规鉴定871

第二节　念珠菌属常规鉴定873

第三节　隐球菌属常规鉴定877

第四节　其他酵母及酵母样真菌的常规鉴定878

第五节　曲霉菌属、毛霉和根霉菌属、镰孢霉属、马尔尼菲青霉菌及其他临床相关真菌常规鉴定883

第五章　支原体和脲原体886

第六章　衣原体888

第七章　抗菌药物敏感性试验890

第一节　概述890

第二节　抗菌药物敏感性试验方法896

第三节　特殊菌的抗菌药物敏感性试验912

第四节　特殊耐药表型的检测917

第五节　抗真菌药物敏感性试验920

第七篇 临床核酸和基因检验927

第一章　临床PCR实验室的设计及仪器设备的配置927

第一节　临床PCR实验室的设计927

一、临床标本的接收927

二、临床PCR实验室设计的一般要求928

第二节　临床PCR实验室仪器设备的配置及工作流程930

一、试剂准备区930

二、标本制备区930

三、扩增区931

四、产物分析区931

第二章　临床核酸和基因扩增检验的质量保证932

第一节　标本采集932

一、标本采集的时间对扩增检测结果的影响932

二、标本采集部位的准备933

三、标本的类型和采集量933

四、采样质量的评价933

五、采样及运输容器933

六、标本采集中的防污染934

第二节　标本运送934

第三节　标本保存934

第四节　室内质量控制（IQC）934

一、测定前质量控制935

二、核酸样本的制备、扩增检测及其质量控制936

三、统计学质量控制938

四、室内质控数据的评价941

五、室内质控的局限性941

第五节　室间质量评价（EQA）941

一、EQA的程序设计941

二、EQA的局限性944

第三章　聚合酶链反应（PCR）技术946

第一节　PCR的基本原理946

第二节　PCR的反应动力学948

第三节　PCR的扩增体系和扩增条件948

一、PCR扩增体系的基本要素948

二、PCR的标准扩增体系949

第四节　PCR的特点950

第五节　PCR的发展951

第四章　实时荧光PCR技术的基本原理和方法952

第一节　实时荧光PCR的基本原理952

一、PCR扩增的理论模式952

二、实时荧光PCR的理论基础953

三、TaqMan实时荧光PCR的基本原理953

四、双链DNA（dsDNA）交联荧光染料实时荧光PCR的基本原理954

五、双杂交探针实时荧光PCR的基本原理955

六、分子信标实时荧光PCR的基本原理955

第二节　实时荧光PCR引物、探针和扩增产物的特点956

第三节　多重实时荧光PCR956

第五章　其他核酸与基因检测的基本技术957

第一节　基因检测的物质基础957

一、基因的组成与分子结构957

二、基因的表达958

三、核酸的理化性质959

第二节　核酸和基因检测的基本技术960

一、限制性酶切图分析960

二、核酸的分子杂交技术961

三、聚合酶链反应技术961

四、凝胶电泳技术962

第六章　病毒核酸的PCR检验964

第一节　乙型肝炎病毒核酸（HBV DNA）的PCR测定964

一、HBV的分子生物学特点964

二、HBV DNA PCR测定964

三、HBV DNA检测的临床意义966

第二节　丙型肝炎病毒核酸（HCV RNA）的PCR测定967

一、HCV的分子生物学特点967

二、HCV RNA逆转录（RT）-PCR检测968

三、HCV RNA检测的临床意义970

第三节　人免疫缺陷病毒1型核酸（HIV-1 RNA）的PCR测定970

一、HIV-1的分子生物学特点970

二、HIV-1 RNA的RT-PCR测定970

三、HIV-1 RNA测定的临床意义972

第四节　人乳头状瘤病毒核酸（HPV DNA）的PCR测定972

一、HPV的分子生物学特点972

二、HPV DNA的PCR检测973

三、HPV DNA检测的临床意义973

第五节　严重急性呼吸综合征（SARS）冠状病毒核酸（SARA-CoV RNA）RT-PCR检测975

一、SARS CoV的分子生物学特性975

二、SARS CoV RNA RT-PCR检测976

三、SARS CoV检测的临床意义978

第六节　巨细胞病毒（CMV）的PCR检测978

第七章　细菌及其他非病毒病原体的核酸检测986

第一节　结核杆菌的PCR检测981

第二节　淋病奈瑟菌的PCR检测983

第三节　幽门螺杆菌的PCR检测985

第四节　沙眼衣原体的PCR检测987

第五节　肺炎支原体的PCR检测988

第六节　解脲支原体的PCR检测990

第七节　刚地弓形虫的PCR检测992

第八章　HLA的基因分型技术994

第一节　人类HLA基因结构的特点及HLA基因分型的优势994

一、HLA-Ⅰ类基因994

二、HLA-Ⅱ类基因995

三、HLA-Ⅲ类基因995

四、HLA基因分型的优势995

第二节　HLA的基因分型技术995

一、限制性片段长度多态性分析法995

二、聚合酶链式反应寡核苷酸探针杂交技术995

三、序列特异性引物聚合酶链式反应分析技术997

四、基于直接测序的基因分型技术998

附录一　临床化学实验室基础999

第一节　实验室常用玻璃器皿999

第二节　加样器1001

第三节　实验室基础试剂配制1005

第四节　pH和缓冲液1008

附录二　计量单位表1015

附录三　本书参考区间1017